10.3969/j.issn.0253-357X.2006.08.001
肿瘤抑制基因Nm23-M1原核表达载体的构建和表达
目的:构建鼠Nm23-M1基因的原核表达载体并进行表达.方法:应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术扩增Nm23-M1基因,将其克隆于pQE30质粒中,测序正确后,构建重组体pQE30-Nm23-M1,在大肠杆菌中诱导NM23-M1蛋白表达.结果:SDS-PAGE凝胶电泳分离显示,在分子量大约17.5 kD处有一诱导表达蛋白带,表达蛋白量占菌体蛋白量的15%,通过Western blot证实,表达产物与抗人Nm23-H1单克隆抗体有特异性免疫反应.经Ni-NTA柱纯化,获得电泳均一性为92%的重组蛋白.结论:成功构建Nm23-M1表达载体,并获得了重组NM23-M1蛋白.
Nm23-M1、基因克隆、基因表达
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R394.114
国家自然科学基金30270510
2006-09-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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