hCGβ在乳酸杆菌中的分泌性表达

摘要：

目的:探索乳酸杆菌携带表达hCGβ避孕疫苗的抗生育作用.方法:用PCR从短小乳酸杆菌染色体中扩增得到S-层蛋白的信号肽序列,将其与hCGβ基因连接后克隆到乳酸杆菌整合型表达载体pIlac的lac启动子下游,得到质粒pIlac hCGβ,电穿孔转化干酪氏乳酸杆菌Lb. casei CECT5276.挑选转化后的耐药菌落,在含红霉素培养基中培养,抽提其染色体DNA,PCR及测序鉴定证实hCGβ基因整合到Lb. casei的基因组中.hCG放免检测上清及细胞裂解液中的hCGβ.结果:hCGβ基因已经整合到Lb. casei的基因组中;细菌产生的目的蛋白约有3/4分泌进入培养上清,而加入诱导剂乳糖21 h后,上清中的蛋白浓度达到峰值,为440 mIU/mL.重组菌在无选择压力条件下培养50代后仍可分泌hCGβ.结论:hCGβ在乳酸杆菌中得到了稳定的、分泌性的表达.

关键词：乳酸杆菌、hCGβ、电穿孔转化

所属期刊栏目：23

分类号：R392.3

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：129-134