大黄泄浊方对5/6肾切除大鼠肾脏保护作用及对PERK/ATF4/CHOP通路的影响

摘要：

目的 通过观察大黄泄浊方对慢性肾衰竭大鼠内质网应激凋亡途径相关蛋白的影响,探讨其延缓肾间质纤维化的可能作用机制.方法 90只SD雄性健康大鼠随机分为假手术组,模型组,大黄泄浊方低、中、高剂量组(6.825g·kg-1、13.65g·kg-1、27.30g·kg-1)和尿毒清颗粒组(2.60g·kg-1),除假手术组外其余分组大鼠均采用5/6肾切除术造模.模型诱导成功后,各药物干预组分别给予规定剂量的中药混悬液灌胃,每日1次,连续8周.给药结束后,检测大鼠血清中血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、血白蛋白(ALB)水平及大鼠24h尿蛋白定量(UTP)水平;苏木素-伊红(HE)、马松(Masson)染色观察肾脏病理学改变;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、IV胶原蛋白(collegen Ⅳ)mRNA的相对表达量情况;免疫组织化学法(IHC)检测肾组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白、大分子B淋巴细胞瘤(Bel-xl)蛋白、Bel-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2基因相关启动子重组蛋白(Bad)的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测肾组织中蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)、转录激活因子4(ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白的表达情况.结果 与假手术组相比,模型组大鼠血SCr、BUN水平显著增高(P＜0.05),ALB水平显著降低(P＜0.05),UTP水平显著增高(P＜0.05),肾组织中α-SMA、collegenⅣ mRNA相对表达量显著增高(P＜0.05),Bcl-2、Bcl-xl表达水平显著降低(P＜0.05),Bax、Bad、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达水平显著增加(P＜0.05);与模型组相比,各药物干预组血SCr、BUN水平均有不同程度降低(P＜0.05),ALB水平均有不同程度增高(P＜0.05),UTP水平均有不同程度降低(P＜0.05),肾组织中α-SMA、collegenⅣ mRNA相对表达量均有不同程度降低(P＜0.05),Bcl-2、Bcl-x1表达水平均有不同程度增高(P＜0.05),Bax、Bad、PERK、ATF4、CHOP蛋白表达均有不同程度降低(P＜0.05).结论 大黄泄浊方可改善肾功能、延缓肾纤维化,其机制可能是通过调控PERK/ATF4/CHOP通路相关蛋白的表达,抑制内质网应激,减少细胞凋亡有关.

关键词：大黄泄浊方、5/6肾切除、肾纤维化、内质网应激、蛋白激酶RNA样内质网激酶(PERK)/转录激活因子4(ATF4)/转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)信号通路

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：河北省中医药管理局科研计划项目2021030

在线出版日期：2023-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2908-2913