10.3969/j.issn.1008-0805.2021.06.11
补益营卫方对衰老皮肤表皮干细胞Wnt/β-catenin信号通路阻断后基因及蛋白表达的影响
目的 Dkk1(Dickkopf-1)阻断Wnt/β-catenin信号通路后补益营卫方对衰老皮肤表皮干细胞Wnt/β-catenin信号通路β-catenin、LRP5基因及Wnt1、β-catenin、Fzd4、LRP5、LRP6蛋白表达水平的影响,探讨补益营卫方延缓皮肤衰老的机制.方法 消化分离出年轻小鼠和衰老小鼠的表皮细胞,进行传代培养.将年轻组细胞分为2组,1组常规培养基培养,另1组用含160ng/ml DKK1的完全培养基培养;老年组细胞分为3组,1组常规培养基培养,1组用含160ng/ml DKK1的完全培养基培养,1组用含160ng/ml DKK1 +2.5%药物血清浓度的完全培养基培养,采用实时荧光定量PCR法检测β-catenin、LRP5 mRNA表达水平,Western Blot法检测Wnt1、β-catenin、Fzd4、LRP5、LRP6蛋白表达量.结果 常规培养基培养表皮干细胞,较年轻组而言,老年组β-catenin、LRP5 mRNA水平明显升高(P<0.05);经DKK1阻断Wnt/β-catenin通路后,年轻组和老年组β-catenin、LRP5 mRNA水平均明显降低(P<0.05);DKK1阻断Wnt/β-catenin通路后,经2.5%药物干预,衰老表皮β-catenin、LRP5 mRNA水平较老年+DKK1组明显降低(P<0.05),且接近年轻+常规组水平.常规培养基培养表皮干细胞,与年轻组比较,老年组Wnt1、β-catenin、Fzd4、LRP5、LRP6蛋白表达水平显著升高(P<0.01);经DKK1阻断Wnt/β-catenin通路后,年轻组和老年组Wnt1、β-catenin、Fzd4、LRP5、LRP6蛋白表达水平均显著降低(P<0.01);DKK1阻断Wnt/β-catenin通路后,经2.5%药物干预,衰老表皮Wnt1、β-catenin、Fzd4、LRP5、LRP6蛋白表达水平较老年+ DKK1组显著降低(P<0.01),且接近甚至低于年轻+常规组的水平.结论 补益营卫方可通过抑制衰老表皮干细胞Wnt/β-catenin通路阻断后的Wnt1、β-catenin、Fzd4、LRP5、LRP6的表达,起到延缓皮肤衰老的作用.
补益营卫方;皮肤衰老;表皮干细胞;Wnt/β-catenin通路
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R285.5(中药学)
国家自然科学基金81774318
2021-10-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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