金铁锁FPS基因的克隆及表达分析

摘要：

目的 从金铁锁Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu中克隆三萜皂苷合成途径中的关键酶法尼基焦磷酸合酶基因FPS,进行序列特征分析和不同组织中的表达情况.方法 根据已获得的金铁锁转录组数据,设计FPS基因全长扩增引物,利用RT-PCR方法获得金铁锁FPS基因的全长cDNA序列,并进行TA克隆、序列分析及原核表达;并设计Real-time PCR扩增引物,测定FPS在不同组织中的表达量.结果 FPS cDNA全长1135bp,开放阅读框1029bp,编码342个氨基酸;构建了pEASY-E1-FPS重组质粒,获得稳定的原核表达体系.Real-time PCR结果表示FPS基因在根中的表达量高于叶和茎.结论 成功克隆了金铁锁FPS基因,构建了稳定的pEASY-E1-FPS原核表达体系,FPS基因的表达分析表明,FPS在金铁锁不同组织均有表达,根中表达量最高.为进一步研究金铁锁中三萜皂苷合成代谢途径及其关建酶表达模式奠定基础.

关键词：金铁锁、法尼基焦磷酸合酶(FPS)、基因克隆、表达分析

所属期刊栏目：27

分类号：R284(中药学)

资助基金：国家自然科学基金No.81260609;No.81560613;云南省自然科学基金资助项目”2014FD035,No.2015FB205-015”

在线出版日期：2017-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2988-2991