杜仲补骨脂药对干预去势鼠成骨细胞增殖以及MMP3-OPN通路蛋白表达的研究

摘要：

目的 探讨杜仲补骨脂药对干预去势鼠成骨细胞增殖和MMP3-OPN-MAPK通路蛋白表达及其作用机理.方法 将10只饲养12周的去势鼠处死,选取股骨胫骨骨髓,进行体外成骨细胞传代培养.将含杜仲补骨脂药对2g生药的药液喂养20只SD大鼠,随机均分为空白对照(A)组(给蒸馏水1ml),低浓度(B)组(给药0.5ml),中浓度(C)组(给药1ml),高浓度(D)组(给药2ml),提取各组处死大鼠含药血清干预成骨细胞,运用MTT法测定成骨细胞增殖能力,RT-PCR法测定通路蛋白MMP3、OPN和MAPK的mRNA水平.结果 术后12周模型组大鼠腰椎及股骨骨密度为(0.163±0.012)g/cm2和(0.152±0.013) g/cm2,假手术组为(0.326±0.015) g/cm2和(0.295±0.006) g/cm2,两组有明显差异(P＜0.05),表明大鼠骨质疏松的模型建立成功.成骨细胞增殖中B至D组均使MTI法检测的光吸收值升高,较A组显著性增加(P＜0.01和P＜0.05),增加幅度与组别关系近似斜线,以D组促增殖作用最显著,增值率达到131％.D组中MMP3含量明显低于其余各组(P＜0.01),OPN和MAPK含量高于其余各组(P＜0.05).同时,B、C、D是随着复方含药血清依次增加的三组,B组中MMP3表达最多,其余组含量依次下降,三组中OPN含量基本依次增加,而MAPK含量在含药血清药物添加后明显增加,不同于A组(P＜0.01).结论 中药杜仲补骨脂药对含药血清可以促进去势鼠成骨细胞的增殖并且通过MMP3-OPN-MAPK通路激活骨重建.

关键词：中药药对、成骨细胞、基质金属蛋白酶3、骨桥蛋白受体、信号通路

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：湖北省武汉市科技局应用基础研究项目;武汉市中青年医学骨干人才项目;湖北省卫生厅青年科技人才项目;湖北省武汉市青年科技晨光计划;武汉市卫生计生委临床医学项目

在线出版日期：2016-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1610-1613