脂肪酸结合蛋白3对足细胞脂肪代谢的影响

摘要：

目的:观察脂肪酸结合蛋白3(FABP3)过度增加对足细胞脂肪代谢的影响. 方法:慢病毒载体转染小鼠永生化足细胞系(HSMPs)以构建稳定过表达FABP3的细胞系.将FABP3-siRNA转染至HSMPs中沉默FABP3,筛选干扰效率最大的FABP3-siRNA片段进行后续干扰实验.实验分组:(1)正常足细胞组;(2) NC-siRNA足细胞组;(3) FABP3-siRNA足细胞组;(4)NC足细胞组;(5)FABP3过表达足细胞组;(6)正常足细胞+棕榈酸(PA)组;(7) NC-siRNA足细胞+PA组;(8) FABP3-siRNA足细胞+PA组;(9)NC足细胞+PA组;(10) FABP3过表达足细胞+PA组.比色法测定细胞内TG和游离脂肪酸的含量.定量PCR法检测各组细胞中过氧化物酶增殖激活受体α(PPARα)、酰基辅酶A氧化酶3(ACOX3) mRNA的表达.Western Blot法检测PPARα、ACOX3蛋白表达水平. 结果:与正常足细胞组相比,FABP3过表达足细胞组细胞内三酰甘油(TG)和游离脂肪酸水平增加(P＜0.05),而FABP3-siRNA足细胞组TG和游离脂肪酸水平下降(P＜0.05).不论在正常环境还是PA环境下,与正常足细胞组相比,FABP3过表达足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达均下调(P＜0.05),而ACOX3 mRNA和蛋白表达均上调(P＜0.05);FABP3-siRNA足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达均上调(P＜0.05),而ACOX3 mRNA和蛋白表达均下调(P＜0.05).与FABP3过表达足细胞组相比,FABP3-siRNA足细胞组PPARα mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05),ACOX3 mRNA和蛋白表达下调(P＜0.05);加入PA后,FABP3过表达足细胞+PA组和FABP3-siRNA足细胞+PA组之间PPARα mRNA和蛋白表达、ACOX3 mRNA和蛋白表达统计学差异显著(P＜0.01). 结论:FABP3过度增加可导致足细胞脂肪代谢紊乱,抑制FABP3过度增加可纠正足细胞脂肪代谢紊乱状态.该研究结果提示抑制FABP3表达可能对代谢因素如糖尿病、肥胖、高脂血症所致的足细胞损伤有一定防御和治疗作用.

关键词：脂肪酸结合蛋白3、过氧化物酶增殖激活受体α、酰基辅酶A氧化酶3、足细胞

所属期刊栏目：24

分类号：R69;R5

资助基金：福建省自然科学基金青年创新项目2012D054

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：319-324