马兜铃酸诱导肾小管上皮细胞损伤中Ngal和Kim-1的变化及其意义

摘要：

目的:研究马兜铃酸(AA)损伤的肾小管上皮细胞中急性肾损伤标志物中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(Ngal)、肾损伤因子(Kim-1)的表达、分泌特点,并对其在AA肾毒性损伤中的意义进行探讨. 方法:采用20 μg/ml AA作用于体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK2细胞),通过RT-PCR和免疫荧光法分别检测Ngal、Kim-1基因和蛋白的表达,ELISA法检测培养上清中Ngal、Kim-1的分泌,底物显色法监测培养上清中N-乙酰-β-葡萄糖苷酶(NAG)的释放,流式细胞术观察细胞周期改变和凋亡情况. 结果:AA处理HK2细胞6～12 h内,Ngal基因呈一过性表达增加,而Kim-1基因在处理24～48h内持续高水平表达.培养上清中Ngal、Kim-1和NAG的分泌呈不同变化规律:给药12h出现Ngal的一过性分泌高峰;Kim-1的分泌高峰出现在24h并持续48h;NAG的分泌在12 h后开始增加,并持续增加至48 h.诱导Ngal、Kim-1表达和诱导细胞凋亡的AA有效剂量不同.诱导Ngal和Kim-1显著分泌的AA剂量仅引起少量细胞凋亡;而引起大量细胞凋亡的AA剂量不能诱导Ngal和Kim-1分泌. 结论:AA诱导的肾小管上皮细胞损伤伴有Ngal和Kim-1的异常表达和分泌.Ngal是AA损伤早期一过性表达和分泌的分子,而Kim-1和NAG则在损伤过程中呈持续分泌,因此对于临床监测AA所致肾小管损伤具有重要意义.Ngal和Kim-1在AA所致肾小管上皮细胞损伤中的异常表达,为进一步阐明AA肾毒性机制以及临床上早期发现马兜铃酸肾病提供了新的指标.

关键词：马兜铃酸、肾小管上皮细胞、凋亡、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白、肾损伤因子

所属期刊栏目：16

分类号：R9(药学)

在线出版日期：2007-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：340-344