金属基质蛋白酶9及其组织抑制物1在肾组织中的表达和调控

摘要：

目的:观察STZ鼠肾组织及高糖状态下正常人类系膜细胞(NHMC)中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、金属基质蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达状况及磷酸肌酸激酶(PKC)抑制剂对其表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)时PKC抑制剂在细胞外基质降解中的作用. 方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组、PKC抑制剂组.PKC抑制剂组采用根皮素10 mg/(kg·d)混悬液灌胃进行干预.第8周处死大鼠(每组6只).检测24h尿蛋白定量、血肌酐水平.用免疫组化方法检测肾脏组织MMP-9、TIMP-1的表达.用ELISA方法检测肾脏组织PKC活性.体外实验,将NHMC置37℃,5%CO2培养箱中进行培养.并将NHMC分为N组(对照组):糖浓度5 mmol/L, H组(高糖组):糖浓度30 mmol/L, P组(高糖加PKC抑制剂):糖浓度30 mmol/L加 chelery thrine chloride 10-5mmol/L, M组(甘露醇组):甘露醇30 mmol/L.于培养24、48、72 h后用MTT法测定细胞增值.采用ELISA方法检测四组PKC活性.分别用RT-PCR及Western Blot检测各组MMP-9、TIMP-1mRNA及蛋白表达. 结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P＜0.01),血肌酐上升(P＜0.05),PKC活性明显增高,MMP-9和TIMP-1出现表达,MMP-9/TIMP-1比值降低.PKC抑制剂干预后其尿蛋白排泄明显减少,血肌酐水平降低,PKC活性下降,MMP-9、TIMP-1表达上调,其MMP-9/TIMP-1比值增高.体外实验中,高糖能促进NHMC增殖,且NHMC的增殖状况随时间的递增而明显增加.高糖(30 mmol/L)能增加系膜细胞PKC的活性,MMP-9、TIMP-1较高表达,MMP-9/TIMP-1比值降低.而PKC抑制剂使PKC的活性降低同时,MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1比值增高. 结论:高糖可诱导PKC活性,PKC抑制剂能使MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1表达比值升高,推测PKC的活性状况可影响DN细胞外基质降解过程.

关键词：糖尿病肾病、金属基质蛋白酶9、金属基质蛋白酶组织抑制物1、磷酸肌酸激酶抑制剂

所属期刊栏目：16

分类号：R6(外科学)

资助基金：国家自然科学基金30370663

在线出版日期：2007-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：134-140