转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的表达

摘要：

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响. 方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人近端肾小管上皮细胞 (HK-2)α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGF mRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变. 结果:HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24 h后,CTGF mRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性.1 ng/ml TGF-β1刺激时,CTGF mRNA表达量开始显著增加, 5ng/ml时达到高峰,10 ng/ml时略有下降, CTGF mRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍(P<0.05). CTGF mRNA表达量呈时间依赖效应.TGF-β1 (5 ng/ml)干预30 min后,CTGF mRNA表达量开始呈现增加趋势,为对照组的1.48倍(P>0.05),2 h后出现显著差异,为对照组的2.14倍(P<0.05);CTGF mRNA表达量在24 h达到高峰,持续至36 h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍(P<0.005);0.5 ng/ml TGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5 ng/ml时达到高峰,10 ng/ml时略有下降.在TGF-β1(5 ng/ml)干预下,HK-2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量α-SMA表达.大部分细胞转分化的时间(72 h)明显晚于CTGF mRNA和蛋白质表达开始增加和达到高峰的时间(30 min和24 h). 结论:未转分化的肾小管上皮细胞可以表达CTGF;TGF-β1 可诱导体外培养的肾小管上皮细胞CTGF高表达.

关键词：转化生长因子、结缔组织生长因子、肾小管上皮细胞、转分化

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分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30270613;上海市卫生局资助项目983009;上海市教委资助项目02BK12;上海市科委资助项目

在线出版日期：2005-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：117-121