大鼠金属蛋白酶组织抑制物-1反义基因TA载体构建及其在肾小球系膜细胞表达的实验研究

摘要：

目的:构建能在真核细胞表达的含大鼠金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)反义基因片段的TA克隆载体,并在体外培养的肾小球系膜细胞表达,为进一步研究TIMP-1反义基因片段抑制肾组织纤维化的作用奠定基础. 方法:用RT-PCR法扩增大鼠TIMP-1 cDNA片段(313bp),并将其反向克隆到真核表达载体pCR 3.1中,用脂质体将大鼠TIMP-1反义基因片段导入培养的大鼠肾小球系膜细胞,半定量RT-PCR法检测系膜细胞TIMP-1表达的变化. 结果:①用限制性内切酶鉴定TIMP-1 cDNA片段插入方向,测序结果证实扩增片段为目的片段;②导入TIMP-1反义基因后,肾小球系膜细胞内TIMP-1表达明显减少. 结论:①成功地构建了含大鼠TIMP-1反义基因片段的TA克隆载体;②该载体能在体外培养的系膜细胞中表达;③TIMP-1反义基因片段能有效地阻抑培养的大鼠系膜细胞中TIMP-1的表达.

关键词：金属蛋白酶组织抑制物-1、反义基因、肾小球系膜细胞

所属期刊栏目：11

分类号：R69(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：第三军医大学校科研和教改项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：245-249