10.13267/j.cnki.syzlzz.2023.069
左金丸醇提物调控糖代谢改善结肠癌细胞西妥昔单抗抵抗的作用机制
目的 探讨左金丸醇提物通过能量代谢糖酵解对人结肠癌细胞西妥昔单抗(cetuximab,CET)抵抗的调节机制.方法 将人结肠癌SW620 细胞分为对照组、CET组和左金丸醇提物联合CET组,CET组加入含有 100 μL不同浓度(0.5、1、2、4 和 8 mg/mL)的CET的培养液,左金丸醇提物联合CET组加入含有 100 μL不同浓度(0.5、1、2、4 和 8 mg/mL)的CET以及 50 μg/mL左金丸醇提物的培养液,对照组不作处理,每组设 4 个复孔.培养 24、48 和 72 h后采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞增殖.应用Western blot法检测各组表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、磷酸化EGFR(phosphorylated EGFR,p-EGFR)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、p-Akt、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和p-mTOR等EGFR通路上下游蛋白的表达情况.采用相关试剂盒分别检测细胞葡萄糖摄取、乳酸产生量和ATP含量.Seahorse能量代谢检测仪检测细胞的基础耗氧率(oxygen comsumpition rate,OCR)、细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)和代谢表型变化.结果 左金丸醇提物对SW620 细胞的增殖作用呈浓度及时间依赖性,72 h的IC50为 62.59 μg/mL,本研究采用低于该值的无毒剂量 50 μg/mL.与CET组比较,左金丸醇提物联合CET组在 24、48 和 72 h时对细胞增殖的抑制作用均增强,且呈时间依赖性,差异均具有统计学意义(均P<0.01);并伴随着EGFR、Akt和mTOR等蛋白磷酸化表达的下调(均P<0.01).与对照组比较,CET组和左金丸醇提物联合CET组的葡萄糖摄取量、乳酸产生量、ATP含量及ECAR均降低(均P<0.05).与CET组比较,左金丸醇提物联合CET组的葡萄糖摄取量、乳酸产生量、ATP含量及ECAR也均下降(均P<0.05).结论 左金丸醇提物联合CET抑制人结肠癌SW620 细胞增殖具有协同作用.左金丸醇提物可能通过调控人结肠癌细胞糖酵解以及降低p-EGFR、p-Akt和p-mTOR等蛋白表达来逆转CET耐药.
结肠癌、西妥昔单抗、耐药、糖酵解、左金丸醇提物
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R737.9;R587.109;R329.25
国家自然科学基金;国家自然科学基金;上海市科学技术委员会资助项目;上海市卫生健康委员会资助项目;上海市第一人民医院嘉定分院医院科技计划项目;上海市第一人民医院嘉定分院医院科技计划项目;上海市第一人民医院嘉定分院医院科技计划项目;上海市第一人民医院嘉定分院医院科技计划项目;上海市第一人民医院嘉定分院医院科技计划项目
2023-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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