肺癌细胞株侧群细胞的分选及干细胞特性的鉴定
目的 肺癌细胞株侧群(side poulation,SP)细胞的分选及干细胞特性的鉴定.方法 选择肺癌细胞株SK-MES-1和NCI-H460,采用流式细胞仪分选SP和非SP(non-SP,NSP)细胞,分别接种于正常培养液和干细胞培养液中培养并传代,观察细胞表型和分化能力.电子显微镜观察细胞的超微结构.免疫荧光检测干细胞标志物CD44的表达.Cell counting kit-8 (CCK-8)法检测细胞增殖能力.集落形成、transwell侵袭实验和裸鼠成瘤实验明确细胞的恶性程度.结果 初次分选SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP和NSP百分比以及再纯化百分比之间比较,差异均无统计学意义(均P ＞0.05).2种细胞株的SP和NSP细胞在干细胞培养液中均不能形成干细胞球,但增殖速度加快.SP细胞呈集聚生长,NSP细胞呈接触抑制的单层生长.SP细胞培养至第5代时,细胞表型变化不明显;NSP细胞第5代出现混杂表型.电子显微镜下SP细胞核质比较高,NSP细胞核质比低.SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP细胞可高表达CD44,组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CCK-8法检测显示,SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP细胞第2、5和7天的吸光度均高于NSP细胞,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP细胞克隆数和克隆形成率高于NSP细胞,侵袭过膜的细胞数增加,裸鼠成瘤数增多(均P＜0.05);均无转移灶,瘤体HE和免疫组织化学染色证实为典型肺癌细胞.结论 肺癌细胞株SP细胞具有干细胞特性,参与肿瘤的增殖、分化、侵袭和成瘤过程.
肺肿瘤/病理学、肿瘤干细胞/细胞学、肿瘤干细胞测定、抗原、CD44、染色与标记、流式细胞术、细胞、培养的
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R734.2;R730.23(肿瘤学)
廊坊市科技支撑计划项目完全自筹式2016013176
2018-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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