石蜡包埋乳腺癌组织HER-2基因mRNA表达检测体系的建立
目的 构建石蜡包埋乳腺癌组织人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)基因mRNA表达相对定量检测体系,探讨反转录定量PCR (reverse transcription quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术在石蜡包埋组织HER-2检测中的应用可行性.方法 石蜡包埋乳腺癌组织切片经二甲苯溶解去蜡后提取总RNA,反转录后的cDNA由水解探针检测HER-2、ACTB及GAPDH等基因序列,△CT法计算HER-2基因mRNA相对表达量,并与荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测结果一致性进行分析.结果 7例FISH检测阳性标本中有6例经RT-qPCR检测为阳性,16例FISH检测阴性标本经RT-qPCR检测均为阴性.本研究中RT-qPCR与FISH结果符合率为95.7%.结论 石蜡包埋乳腺癌组织是HER-2基因mRNA表达检测的实用材料,完善的RT-qPCR实验设计和质量控制可确保其结果与FISH有较高的一致性.
乳腺肿瘤/病理学、逆转录聚合酶链反应、基因表达、基因、erbB-2、RNA、信使、石蜡包埋/方法
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R737.9(肿瘤学)
厦门市科技计划社会发展项目3502Z20094019;厦门市科技计划医疗卫生项目3502220084023
2012-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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