实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞WT1 mRNA方法的建立

摘要：

目的建立实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞WT1 mRNA的方法.方法在PCR反应体系中加入了一条与靶基因序列互补的寡核苷酸双荧光标记探针(5′端为荧光报告基团,3′端为荧光淬灭基团),建立实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞WT1 mRNA的方法,并测试其特异性及敏感性.结果所建立的实时荧光定量RT-PCR检测WT1 mRNA的方法具有很好的准确性,检测WT1 mRNA的灵敏度达10-4.方法的变异系数为1.93%,稳定性较好.循环阈值与PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系(斜率为-3.5,线性相关系数r=0.997),可对WT1 mRNA的表达进行准确定量分析.结论实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞WT1 mRNA的方法具有很好的特异性和敏感性,且操作简便、安全、快速.

关键词：癌基因、逆转录-聚合酶链反应/方法、荧光、白血病、细胞、RNA

所属期刊栏目：18

分类号：R733.7;R730.43(肿瘤学)

资助基金：浙江省卫生厅资助项目98B039

在线出版日期：2003-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：371-374