CaMKⅡγ基因沉默对破骨细胞分化中NFATc1 、TRAP、c-Src基因表达的影响

摘要：

目的 研究钙调蛋白依赖性激酶II( Calmodulin-dependent kinase II,CaMKII) γ基因沉默对破骨细胞分化过程中活化T-细胞核因子c1(Nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)、非受体酪氨酸激酶(Cell-sarcoma re-ceptor coactivator,c-Src)、抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)基因表达的影响,探讨CaMKIIγ在破骨细胞分化中的作用和分子机制.方法 用慢病毒构建CaMKIIγ RNA干扰载体,转染RAW264. 7细胞,实验分为A、B、C三组,分别为对照组、阴性载体组和干扰载体组;三组细胞转染12 h后,用50 ng RANKL诱导向破骨细胞分化;诱导5 d后收获细胞,采用实时荧光定量 PCR、Western blot、免疫荧光化学检测三组细胞中NFATc1、TRAP、c-Src基因表达情况.结果C组中NFATc1、TRAP、c-Src mRNA水平较A组分别下降了49. 86% 、43. 65%和53. 57% (P<0. 001),蛋白水平分别下降了54. 22% 、46. 75%和45. 86% (P<0. 001);而B组与A组比较无统计学差异(P>0. 05).免疫荧光化学检测C组上述基因荧光强度明显弱于A、B组,且破骨细胞生成明显少于A、B组.结论 CaMKIIγ RNA干扰显著抑制了NFATc1、TRAP、c-Src基因表达,提示CaMKIIγ在破骨细胞分化中起着关键调控作用.

关键词：钙调蛋白依赖性激酶IIγ、RNA干扰、活化T细胞核因子c1、非受体酪氨酸激酶、抗酒石酸酸性磷酸酶

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分类号：R782(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金81270965;河北省教育厅重点研究项目ZD2015005;河北省自然科学基金H2017209114

在线出版日期：2019-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：294-299