10.3969/j.issn.1006-5725.2023.20.005
氯普噻吨调节Akt/mTOR通路对人急性髓系白血病细胞自噬和凋亡的影响
目的 探讨氯普噻吨通过调节蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对人急性髓系白血病(AML)细胞自噬和凋亡的影响.方法 以SKNO-1、MOLM-13两个细胞系为研究对象,0、20、40、60 µmol/L氯普噻吨分别处理SKNO-1、MOLM-13细胞6、12、24 h,CCK-8检测细胞增殖情况.实验分为4组,对照组正常培养、SC79组用5 mg/L SC79处理细胞2 h,氯普噻吨组用40 µmol/L氯普噻吨处理细胞12 h,氯普噻吨+SC79组在SC79组基础上添加40 µmol/L氯普噻吨处理细胞12 h.单丹磺酰尸胺(MDC)染色检测自噬的发生情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质免疫印迹检测自噬相关蛋白SQSTM1/p62、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B),凋亡相关蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(PARP)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase3)、激活型caspase3(cleaved caspase3)以及Akt/mTOR信号通路相关蛋白Akt、磷酸化(p)-Akt、mTOR、p-mTOR表达情况.结果 在SKNO-1、MOLM-13细胞中,6、12、24 h时,与0 µmol/L氯普噻吨相比,20、40、60 µmol/L氯普噻吨处理后细胞增殖抑制率升高(P<0.05);在同一时间点,随着氯普噻吨浓度的升高,细胞增殖抑制率升高,40 µmol/L氯普噻吨处理细胞12 h进行接下来研究.在SKNO-1、MOLM-13细胞中,与对照组相比,SC79组细胞凋亡率、自噬小体阳性率,LC3B、PARP、cleaved caspase3/caspase3蛋白表达水平降低(P<0.05),SQSTM1/p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05);而氯普噻吨组表现出相反趋势(P<0.05);在SC79组基础上添加氯普噻吨,与氯普噻吨组相比,细胞凋亡率、自噬小体阳性率,LC3B、PARP、cleaved caspase3/caspase3蛋白表达水平降低(P<0.05),SQSTM1/p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 氯普噻吨能够抑制Akt/mTOR通路促进人AML细胞自噬和凋亡.
氯普噻吨、蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路、人急性髓系白血病细胞、自噬、凋亡
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R733.71(肿瘤学)
河南省医学科技攻关项目2022030024087
2023-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
2584-2590