10.3969/j.issn.1006-5725.2023.20.003
连接蛋白43在氧化低密度脂蛋白诱导RAW264.7细胞自噬中的作用
目的 探究连接蛋白43(Connexins43,Cx43)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipo-protein,ox-LDL)诱导小鼠单核巨噬细胞系(RAW264.7细胞)自噬中的作用.方法 利用ox-LDL(100 μg/mL,24 h)构建RAW264.7自噬及泡沫化模型.实验分为Control组、ox-LDL组、ox-LDL+Gap26组、ox-LDL+Gap19组.qRT-PCR检测各组Cx43、自噬蛋白Beclin-1及LC3B mRNA水平.Western blot检测Cx43、Beclin-1及LC3B蛋白水平.细胞免疫荧光技术检测Cx43、Beclin-1 及LC3B 在RAW264.7细胞上的定位和表达.结果 油红O染色结果显示,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,ox-LDL组细胞浆内出现红染脂滴,即细胞发生泡沫化.Western blot、qRT-PCR及免疫荧光结果显示,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,ox-LDL组细胞中Cx43的表达水平升高.此外,Western blot、qRT-PCR及免疫荧光结果表明,ox-LDL干预RAW264.7细胞24 h后,与Control组相比,ox-LDL组细胞的Beclin-1、LC3BmRNA及蛋白表达水平降低;与ox-LDL组相比,ox-LDL+Gap26组及ox-LDL+Gap19组的自噬相关蛋白表达水平升高.结论 阻断Cx43能促进ox-LDL诱导RAW264.7细胞自噬.
连接蛋白43、巨噬细胞、自噬
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R36(病理学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国医学科学院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;兵团国际合作项目;天山英才培养计划;石河子大学青年创新培育人才计划项目
2023-11-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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