脐带间充质干细胞改善自身免疫性肝炎免疫微环境的机制

摘要：

目的 探讨脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)免疫微环境的影响及潜在的调控机制.方法 将AIH患者外周血单个核细胞(PBMCs)与UCMSCs分别以10∶1(Co-culture 1)或5∶1(Co-culture 2)的比例共培养.流式细胞术检测Th17、Treg及Th17/Treg比值;ELISA检测上清中转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-17(IL-17)和IL-6的水平.运用RNA-seq筛选PBMCs共培养前后的差异基因,富集前15个表达量最高的mRNA进行后续生物信息分析.Western blot和RT-qPCR测定Foxp3、RORγt表达水平.结果 UCMSCs显著降低CD3+ CD8-IL-17A+ Th17比例,增加CD25+Foxp3+CD4+ Treg比例.与PBMCs组相比,Co-culture 2组的TGF-β1显著上调(P<0.01),IL-17和IL-6显著下调(P<0.05).转录组测序分析发现转录因子主要集中在免疫应答及T细胞激活等领域;其中SMAD3和STAT3占据较核心的地位.蛋白和mRNA检测显示,Co-culture 2组Foxp3和SMAD3的表达水平显著上调(P<0.05),RORγt和STAT3的表达水平显著下调(P<0.05).结论 UCMSCs通过TGF-β通路促进Th17向Treg细胞分化,抑制炎症反应改善肝脏免疫微环境.

关键词：UCMSCs/PBMCs共培养系统、肝脏免疫微环境、RNA-seq、Th17/Treg平衡、TGF-β信号通路

所属期刊栏目：39

分类号：R575.1(消化系及腹部疾病)

资助基金：国家自然科学基金;广州医科大学学生创新能力提升计划项目;广州医科大学学科建设项目;广州医科大学本科生能力提升创新项目;市校院企联合资助项目;广州市医学重点学科项目;广东高校生物靶向诊治与康复重点实验室

在线出版日期：2023-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1466-1472