10.3969/j.issn.1006⁃5725.2022.20.004
miR?let?7c通过介导精原干细胞分化改善小鼠精子质量的作用机制
目的 本研究拟通过miR?let?7c抑制剂转染精原干细胞(SSCs)观察其对SSCs分化和小鼠精子质量的影响.方法 SSCs从新生小鼠(3~6 d龄)的睾丸中分离出来,纯度通过流式细胞术对SSCs的标志物ID4和Thy1进行测定.细胞用miR?let?7c抑制剂转染并通过qRT?PCR检测转染效率,转染后48 h通过免疫组化和Western blot评估SSCs的增殖(GFRa1、PLZF和ID4)和分化(C?Kit)标志物的表达水平.体内实验中,60 mg/(kg·d)腹腔注射环磷酰胺被用于制备小鼠少弱精子症模型,附睾内注射转染miR?let?7c抑制剂的SSCs,以观察生精细胞、间质细胞等变化和分析精子浓度、活力及形态.结果 miR?let?7c抑制剂组转染后SSCs分化标志物的表达明显升高,GFRa1、PLZF和ID4蛋白降低,并显著提高少弱精子症小鼠的精子浓度、精子活力和正常形态率.结论 miR?let?7c抑制剂促进精原干细胞分化并改善小鼠精子质量.
miR-let-7c、精原干细胞、细胞分化、细胞增殖
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R34(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金81860583
2022-12-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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