10.3969/j.issn.1006-5725.2022.01.009
结核分枝杆菌PknG抑制内毒素介导的巨噬细胞炎症免疫应答
目的 利用原核表达系统表达、纯化结核分枝杆菌分泌蛋白PknG,并探讨PknG在炎症免疫应答中的作用.方法 从NCBI数据库中获取结核分枝杆菌PknG全基因组序列,高保真PCR扩增结核分枝杆菌PknG全基因序列,构建PknG-pET28a融合表达质粒,IPTG诱导表达PknG蛋白,镍柱及不同浓度咪唑纯化及透析PknG蛋白,SDS-PAGE及western blot验证PknG蛋白的表达,脂多糖(LPS)处理巨噬细胞0、12和24 h,通过Real-time PCR及ELISA方法检测促炎细胞因子TNF-α及IL-6的表达.结果 成功诱导表达及纯化结核分枝杆菌PknG蛋白,PknG抑制LPS处理的巨噬细胞促炎细胞因子TNF-α及IL-6的表达.结论 结核分枝杆菌PknG蛋白抑制LPS诱导巨噬细胞促炎细胞因子TNF-α及IL-6的表达,可作为结核分枝杆菌感染合并脓毒血症过程中治疗的一个潜在靶点.
结核分枝杆菌;内毒素;巨噬细胞;PknG;炎症
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R56(呼吸系及胸部疾病)
国家自然科学基金;贵州省科技计划项目;遵义市科技局课题;遵义医学院硕士启动基金
2022-02-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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