RNAi介导的CK2α基因沉默对喉癌细胞上皮间质转化过程的影响

摘要：

目的 探讨人喉癌Hep-2细胞稳定转染干扰质粒后,蛋白激酶CK2α表达对其上皮间质转化过程的影响.方法 应用体外构建的干扰质粒pGCsi-H1-CK2α稳定转染人喉癌上皮细胞Hep-2,分为未转染组(parental)、对照质粒转染组(pGCsi-H1-control)和干扰质粒转染组(pGCsi-H1-CK2α).转染24 h后经G418筛选出稳定转染的细胞系,应用Real-time PCR和Western blot进行鉴定;采用Transwell小室检测转染后Hep-2细胞的侵袭和迁移能力;使用相差显微镜观察各组细胞形态并通过Western blot检测细胞上皮标志物E-cadherin、vimentin及转录因子slug、snail的表达.结果 干扰质粒转染组中CK2α基因在mRNA和蛋白水平的表达明显低于未转染组及对照质粒转染组(P<0.01).Transwell实验显示稳定敲低CK2α阻止了Hep-2细胞的迁移与侵袭.与未转染组及对照质粒转染组相比,干扰质粒转染组中的E-cadherin的表达增加,但是snail、slug和vimentin的表达下降.结论 RNAi介导的CK2α抑制表达抑制了喉癌细胞上皮间质转化过程.

关键词：人喉癌上皮细胞、蛋白激酶CK2α、侵袭转移、上皮间质转化

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资助基金：辽宁省自然科学基金指导计划项目20170541000

在线出版日期：2018-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1253-1257