重组人Bcl2及Ercc1基因腺病毒的构建及对肺癌细胞凋亡的影响

摘要：

目的:通过 RNA 干扰技术沉默 B 淋巴细胞瘤-2 基因 ( Bcl2 ) 和切除修复交叉互补基因 1 ( Ercc1 )并观察对肺癌细胞株增殖的影响. 方法:分别设计特异性沉默 Bcl2 和 Ercc1 的短发夹 RNA 序列,并克隆到腺病毒骨架载体上形成重组腺病毒质粒. 将质粒转染到 HEK293 细胞中,包装和扩增形成完整高滴度的重组腺病毒, 将腺病毒感染人肺癌 H460 细胞株, 流式细胞术检测抑制 Ercc1 和 Bcl2 基因后肺癌细胞凋亡变化. 结果:通过酶切鉴定,证实重组腺病毒载体构建成功, PCR 鉴定扩增出 1 200 bp 的目的条带,病毒滴度为 5 × 1011/mL. 流式细胞术检测结果显示,AdsiBcl2-Ercc1 组细胞凋亡率比单基因干扰组增高.结论:成功构建干扰 Bcl2 和 Ercc1 的重组质粒及重组腺病毒,同时沉默 Bcl2 和 Ercc1 可以促进肺癌细胞凋亡.

关键词：肺肿瘤、凋亡、重组腺病毒、H460细胞

所属期刊栏目：31

分类号：R73;R96

资助基金：山西省青年科学基金项目2012021012-3

在线出版日期：2015-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2443-2446