抑制SIAH-1功能对α-synuclein选择降解通路的影响

摘要：

目的：探讨E3泛素连接酶（SIAH）在α－突触核蛋白（α-synuclein）降解和细胞死亡中的作用。方法：用MTT法检测雷帕霉素和SIAH-1抗体处理24 h后的细胞活性，Western blot检测LC3-Ⅱ、E1、SIAH-1、P53和α-synuclein蛋白表达， RT-PCR 检测相关蛋白的 mRNA水平，用免疫荧光探讨 SIAH抗体处理后α-synuclein、SIAH-1和LC3在细胞的分布和共定位情况。结果：MPP＋处理增加α-synuclein、E1表达和SIAH-1的活性，然而LC3-Ⅱ、P53和α-synuclein的蛋白质水平显著降低，而抗SIAH-1抗体处理扭转了这一趋势， E1水平明显增加。雷帕霉素处理在MPP＋组中降低SIAH-1和α-synuclein水平。 SIAH-1抗体显著降低α-synuclein的免疫阳性染色，而α-synuclein和LC3在细胞内失去共定位。结论：SIAH-1抗体降低了α-synuclein单泛素化和聚集，并有效地促进其通过泛素蛋白酶体系统通路降解。因此， SIAH功能对α-synuclein聚集性及降解通路的选择有明显的影响。

关键词：E3泛素连接酶、MPP+、α-突触核蛋白、帕金森病、自噬、泛素蛋白酶体系统

分类号：R73;R74

资助基金：江苏省自然科学基金面上项目编号BK2011402

在线出版日期：2015-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1758-1762