风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库的构建和分析

摘要：

目的:构建风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库.方法:外科手术治疗中取风湿性心脏病患者新鲜心耳组织,用QIAGEN试剂盒提取RNA,用逆转录酶合成cDNA第一链,用长距离PCR合成双链cDNA,SfiⅠ酶切cDNA后过柱分级收集,用T4 DNA连接酶重组连接入λTriplEx2载体,最后用λ噬菌体包装后构建成原始文库,用PCR、X-gal等方法进行文库质量鉴定.结果:构建了风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106 pfu/mL,重组率为99％,81.25％外源重组片段大于1 kb.结论:成功构建了高质量的风湿性心脏病患者心肌组织噬菌体表达文库,为风湿性心脏病的分子机制寻找新的研究策略奠定了实验基础.

关键词：风湿性心脏病、噬菌体表达文库、构建

所属期刊栏目：28

分类号：R65;R54

资助基金：国家自然科学基金资助项目30700327;广东省自然科学基金资助项目7300047;广东省科技计划项目2008658;广东省医学科研基金项目A2010046

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1398-1400