小鼠Nestin启动子的克隆及其表达载体的构建

摘要：

目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力.方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N1质粒双酶切下EGFP序列,克隆入pcDNA3.1多克隆位点中,重组构建质粒,分别用Nestin启动子全序列和核心序列调控EGFP基因的表达.重组质粒分别转染Nestin+细胞和Nestin-细胞,观察EGFP基因在细胞内的表达情况.结果:成功克隆出Nestin基因启动子全序列和核心序列.经酶切鉴定及测序证实正确.二序列皆能调控EGFP在各种细胞内的表达.结论:Nestin基因启动子全序列和核心序列具有非特异性调控能力.

关键词：遗传载体、启动子、Nestin、调控、转染

所属期刊栏目：28

分类号：S88;S82

资助基金：江苏省自然科学基金项目BK2010180;徐州市科技计划项目XM098116;徐州医学院院长基金项目2010KJZ10

在线出版日期：2012-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：370-373