维生素D受体野生型及FokⅠ突变型真核表达载体的构建

摘要：

目的:克隆人维生素D受体(VDR)全长,构建VDR野生型及FokⅠ突变型重组真核表达质粒.方法:提取总RNA,RT-PCR方法扩增将产物用EcoRⅠ和Hind Ⅲ进行双酶切后与pcDNA3.1(-) B-myc/his载体连接形成重组载体;对野生型VDR基因行定点诱变,构建突变型FokⅠ VDR质粒.结果:重组质粒被酶切为两条带,一条为1 300 bp(代表人VDR),一条为5 500 bp(空载体);片段大小与理论值相符.测序结果与Genbank序列完全相同.结论:成功克隆了人VDR基因全长并成功构建了人野生型和突变型FokⅠVDR重组真核表达载体pcDNA3.1(-)B-myc/his hVDR,为进一步研究VDR基因变异与相关肿瘤易感性的分子机制奠定了实验基础.

关键词：受体、骨化三醇、真核表达载体、pcDNA3.1(-)、B-myc/his hVDR

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分类号：R39;R97

资助基金：河北省教育厅科学研究计划项目Z2009406;承德市科学技术研究与发展指导计划项目200821034

在线出版日期：2011-06-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1135-1137