含A(H1N1)流感病毒NP基因病毒样颗粒的构建和表达

摘要：

目的:构建并表达含有A(H1N1)流感病毒NP基因片段并可抗RNase降解的病毒样颗粒,作为RT-PCR检测的阳性对照.方法:设计带有Nco Ⅰ、BamHⅠ酶切位点的引物克隆MS2噬菌体的装配蛋白和包膜蛋白基因,化学合成含BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的A(H1N1)流感病毒NP基因片段,将这些基因连接到质粒载体pET-28b(+)上,转化到E.coli BL21(DE3)感受态细胞中进行表达,表达产物进行纯化,然后进行RNase攻击试验和稳定性试验.结果:获得含NP基因片段的病毒样颗粒,可抵抗RNase降解,并能在37℃稳定保存30 d.结论:该病毒颗粒稳定、安全、可靠,可作为A(H1N1)流感病毒RT-PCR检测、定量分析的有效阳性参考品.

关键词：流感病毒A型、H1N1亚型、RT-PCR、阳性对照、病毒样颗粒、核糖核酸酶

所属期刊栏目：26

分类号：R39;R51

资助基金：河南省科技攻关计划102102313105

在线出版日期：2010-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3083-3086