丙型肝炎病毒RNA聚合酶在HepG-2细胞的稳定表达及活性分析

摘要：

目的:探讨丙型肝炎病毒RNA聚合酶(NS5B)在肝癌细胞株HepG-2的稳定表达与活性.方法:Sca I酶切合有丙型肝炎病毒NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,线性化的pcDNA-5B通过脂质体介导转染HepG-2细胞,G418筛选转染细胞.阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验鉴定稳定表达NS5B蛋白的RNA聚合酶活性.结果:NS5B基因可整合到转染的HepG-2细胞的染色体上,并能有效转录和表达.体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验表明稳定表达的NS5B在体外和细胞内均具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.结论:肝细胞HepG-2可以稳定表达丙型肝炎病毒NS5B,且具备RNA依赖的RNA聚合酶活性.

关键词：肝炎病毒属、RNA聚合酶、HepG-2细胞、表达、活性

所属期刊栏目：26

分类号：R73;R57

资助基金：江西农业大学博士基金资助项目2727

在线出版日期：2010-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：355-357