缺氧缺血对体外血脑屏障通透性的影响及其机制的研究

摘要：

目的:探讨血脑屏障紧密连接(BBB-tight junction,BBB-TJ)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在缺氧缺血诱导的体外血脑屏障(BBB)模型通透性增加中的作用及相互关系.方法:ECV304与原代培养的星形胶质细胞共培养建立体外BBB模型.实验分为正常对照组(C组)、缺氧缺血组(H/I组)、BB-1101预处理组(P组)3组.透射电镜分别观察各组BBB-TJ变化;通过γ计数仪测定核素标记牛血清白蛋白(125I-BSA)通透量检测BBB屏障功能.直接免疫荧光观察细胞骨架蛋白Actin分布的改变,Westem blot检测Actin、Octludin、ZO-1和MMP-9表达量的改变.结果:电镜观察见C组内皮细胞间形成光滑、连续、较高密度的紧密连接,免疫荧光检测见细胞骨架蛋白Actin主要分布在细胞膜及细胞核周边,形成肌动蛋白丝带,轮廓内包含大量束状排列有序的微丝结构,细胞间连接紧密.缺氧缺血后,H/I组细胞间连接开放,形成裂隙,而胞膜及胞核周边肌动蛋白丝带模糊、部分断裂,并有应力纤维形成,出现细胞间裂隙,BBB对125I-BSA通透性明显增高,与C组和P组比较,差异有显著性(P＜0.01),同时ZO-1的表达量显著减少,MMP-9的表达显著增多,而Octludin和Actin的表达量无改变.BB-1101预处理后,P组细胞BBB-TJ破坏减少,周边肌动蛋白丝带重新出现,细胞间裂隙较少,125I-BSA通透量较H/I组明显下降(P＜0.01),MMP-9的表达较H/I组也明显减少(P＜0.01).结论:(1)缺氧缺血能促使BBB-TJ的开放进而导致BBB通透性增加;(2)BBB-TJ的开放可能与BBBActin的重组及ZO-1的表达量降低有关;(3)缺氧缺血能增加MMP-9的表达;(4)MMP-9与缺氧缺血时BBBActin的重组及ZO-1的表达减少相关.

关键词：缺氧缺血、脑、血脑屏障、通透性、紧密连接部、明胶酶B

所属期刊栏目：24

分类号：R74(神经病学与精神病学)

资助基金：广东省梅州市科技局科研项目2007821

在线出版日期：2008-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：515-518