maltosyl-agarose亲和层析法提取人肺灌洗液中肺表面活性物质结合蛋白 A及其鉴定

摘要：

目的:提取及纯化人肺灌洗液中肺表面活性物质结合蛋白 A(SP-A).方法:由支气管肺泡灌洗液经 10 000 g离心 40 min获得的沉淀中提取 SP-A.沉淀溶解于 6M的尿素, SP-A蛋白重新复性后上清过 maltosyl-agarose柱进行亲和层析,用梯度 EDTA洗脱 SP-A,并过 surpose 6柱纯化.聚丙烯酰胺电泳和 Western blotting鉴定.结果:经亲和层析法可以从人肺灌洗液中提取出高纯度的 SP-A,聚丙烯酰胺电泳在 36 ku和 70 ku处可见清晰条带,在分子量 118 ku以上亦可看到 3条清晰条带,经 Western blotting鉴定均为特异性 SP-A蛋白.结论:采用 maltosyl-agarose亲和层析法可以从肺灌洗液中获得高纯度的 SP-A.为进一步研究 SP-A的功能和制备 SP-A单克隆抗体提供了充足的 SP-A来源.

关键词：肺表面活性物质、载体蛋白质类

所属期刊栏目：21

分类号：R3(基础医学)

资助基金：科技部1035工程项目96-901-05-244

在线出版日期：2005-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：884-886