rsistin基因的克隆及载体的构建

摘要：

目的:克隆小鼠resistin基因及其连载体的构建,为进一步研究resistin的功能打下基础.方法:根据报道的小鼠resistin基因的全长mRNA序列为目的基因,即提取小鼠脂肪组织中的RNA,以RNA为模板,在逆转录酶的作用下,逆转录(RT)合成resistinDNA,再在TaqDNA聚合酶的作用下聚合酶链反应(PCR)扩增:resistin cDNA,将扩增PCR产物(resistin cDNA)经纯化后与A-T连接于pGEM-T载体,重组质粒转化JM 109感受态菌,蓝白斑筛选阳性菌落,摇菌、提取质粒.结果:提取的总RNA纯度A260/280为1.9,电泳条带28 s:18 s比例约为2:1,RT-PCR与欲扩增的目的片段的理论长度363 bp相符,重组质粒插入pGEM-T的DNA片段的核苷酸序列与小鼠resistin基因mRNA编码区序列完全一致.结论:成功克隆了小鼠resistin cDNA基因,为构建resistin基因打下基础.

关键词：小鼠resistin基因、载体、构建

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分类号：R318.5(医用一般科学)

在线出版日期：2009-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：1129-1130