CD34阳性表皮干细胞对砷急性细胞毒性的耐受力分析

摘要：

目的 研究CD34阳性(CD34+)表皮细胞的干细胞特性及其对亚砷酸钠(NaAsO2)急性细胞毒性的耐受力,为利用干细胞模型进一步探索砷的致癌机制奠定基础. 方法 用免疫磁珠法从HaCaT细胞中分选CD34+细胞,用流式细胞术检测CD34+细胞的富集率,观察细胞的全克隆形成能力,用实时荧光定量PCR(reverse transcript quantitative PCR,RT-qPCR)检测CD34+细胞和未分选的HaCaT细胞(对照细胞)中干细胞标记物(CD34、p63、K5、K14、OCT4,SHH)以及药物转运基因(ABCC1、ABCC2、ABCG2)、解毒酶基因(GST-Pi)、抗氧化基因(NRF2、HO-1、GCLC)的表达水平;将CD34+细胞和对照细胞用0～ 150 μmol/L NaAsO2处理24 h,以MTS法检测细胞活力. 结果 经免疫磁珠分选后,CD34+细胞富集率从0.10％±0.05％升至88.6％±2.5％ (P＜0.001);CD34+细胞全克隆形成数量为对照组的2.4倍(P＜0.01),CD34、p63、K5、K14、OCT4和SHH等干细胞标志物基因在CD34+细胞中的转录水平显著升高(P＜0.05),分别为对照细胞的(18.20±2.81)倍、(2.21±0.07)倍、(1.60±0.13)倍、(3.89±0.05)倍、(2.27±1.34)倍和(4.18±0.91)倍;在20～150 μmol/LNaAsO2浓度范围内,CD34+细胞的细胞活力显著高于对照组(P＜0.05),NaAsO2对CD34+细胞和对照细胞的半数致死量(LC50)分别为98.3 μmol/L和50.1 μmol/L;CD34+细胞中ABCC1、ABCC2和ABCG2等药物转运基因的mRNA水平显著高于对照组(P＜0.05),分别为对照组的(3.00±0.30)倍、(1.23±0.30)倍和(2.59±0.38)倍;解毒酶GST-Pi的mRNA水平为对照组的(2.19±0.56)倍;NRF2、HO-1和GCLC等抗氧化基因在CD34+细胞中的转录水平显著高于对照组(P＜0.05),分别为对照组的(2.22±0.23)倍、(2.59±0.36)倍和(2.19±0.24)倍. 结论 CD34+细胞具备一定的表皮干细胞特性且对NaAsO2的急性细胞毒性具备更高的耐受力.

关键词：砷、皮肤、干细胞、CD34

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分类号：R114(卫生基础科学)

资助基金：青年科学基金项目81302391;教育部优秀博士学位论文专项基金201485

在线出版日期：2017-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：653-656