大肠埃希菌O157:H7的实时荧光PCR检测方法研究

摘要：

目的 建立一种敏感、特异、快速的大肠埃希菌O157:H7的检测方法,应用于突发公共卫生事件及食源性致病菌流行病学调查的检测. 方法 根据GenBank大肠埃希菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和TaqMan探针,对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立实时荧光PCR检测大肠埃希菌O157:H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价. 结果 大肠埃希菌O157:H7菌株的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性；该方法检测的灵敏度可达1×102 cfu/ml.模拟污染的猪肉、羊肉、鸡肉、生食蔬菜样品,均可检出1×104 cfu/ml的细菌.从细菌核酸提取至完成检测约需3h. 结论 建立的实时荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速等优点,可用于大肠埃希菌O157:H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.

关键词：大肠埃希菌O157:H7、实时荧光PCR、检测方法

所属期刊栏目：19

分类号：R378.2+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：宝鸡市卫生局科研立项课题2011-45

在线出版日期：2012-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：362-364