DNA环介导恒温扩增技术在乙型肝炎病毒表面抗原基因检测中的应用

摘要：

目的 建立一种适合基层医疗机构开展的快速检测乙肝病毒的环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术. 方法根据美国国立卫生研究院(NIH)基因序列数据库(genbank)公布的乙型肝炎病毒表面抗原基因序列(登录号:V00867),针对病毒表面抗原pre-S基因设计两对特异性的LAMP内外引物,提取DNA作为扩增模板,优化LAMP反应体系,恒温65℃反应1 h,反应结果采用目测或琼脂糖凝胶电泳法判断;同时设计一对特异性的引物采用聚合酶链式反应(PCR)对35例乙肝感染者血清进行扩增,比较两种方法在检测中的特异性和敏感性. 结果35例乙肝病毒患者血清LAMP反应检测阳性20例,普通PCR法检测阳性20例;对同一病毒模板做系列倍比稀释,LAMP能榆测出的极限为10 -8,而普通PCR的检测极限为10-6. 结论 LAMP能快速、敏感、特异地检测乙肝病毒表面抗原基因,实验仪器简单,不需要特殊的检测设备,适合基层各种检测机构的使用.

关键词：乙型肝炎病毒、LAMP、检测、敏感

所属期刊栏目：17

分类号：R373.2+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2011-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：240-242