人防御素-5基因原核表达载体pRSET-A的构建

摘要：

目的 利用分子生物学技术和方法将pRSET-A质粒改建为带有人α-防御素5(HD-5α)基因的新型表达载体pRSET-HD-5α.为大量生产和提纯具有生物活性人防御素5抗菌肽的研究提供实验基础. 方法 PCR技术,以设计的引物P1/P2从cDNA文库中扩增人α-防御素5基因片段,并将扩增出来的目的基因和pRSET-A质粒用BamH Ⅰ和EcoRI双酶切后连接构成重组质粒,然后转化大肠杆菌DH-5α,筛选阳性克隆.最后对PCR及酶切鉴定含有目的基因的克隆进行测序和电泳. 结果 获得α-防御素-5基因片断大小正确,经测序证明其碱基序列为编码目的基因的正确序列;电泳结果证明已将此片段克隆到pRSET-A内. 结论 成功构建了HD-5α基因的新型表达载体pRSET-A/HD-5α.

关键词：人防御素5、克隆、表达载体

所属期刊栏目：15

分类号：R392.11

在线出版日期：2008-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：45-47