10.3969/j.issn.1006-3110.2005.02.018
穿透支原体主要外膜蛋白pET20b(+)/p35重组载体的构建、表达及鉴定
目的构建高表达且稳定的pET20b(+)/p35重载体,能在其中进行诱导高表达并得到纯化的p35蛋白.方法运用Blast、Pfam等生物信息学手段对穿透支原体(Mpe)p35基因序列结构与功能预测,将p35基因全长插入原核表达载体pET20b(+)中,在BL21StarTM(DE3)进行诱导表达、用Ni柱纯化,在GSH-GSSH体系中逐渐降低其变性剂的方法复性蛋白,Western-blot进行鉴定.结果成功的构建了pET20b(+)/p35重组载体,并能在宿主菌中较高表达;此蛋白以包涵体的形式进行表达.结论得到了纯化的p35蛋白,为进一步研究其生物学功能及其空间结构奠定了基础.
穿透支原体、主要外膜蛋白、p35基因、原核表达
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R375(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2005-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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263-265