10.3969/j.issn.1006-3110.2004.02.002
沙眼衣原体ompA基因真核表达载体的构建及在HeLa细胞中的表达
目的构建沙眼衣原体(Ct)ompA基因真核表达重组质粒,利用脂质体体外转染HeLa细胞,为核酸疫苗的研制作准备.方法应用PCR技术从D型Ct基因组中扩增ompA全长基因,重组入pUCm-T克隆载体.将pUCm-T/ompA中的ompA外源基因片段经酶切、连接等反应,亚克隆人pcDNA3.1真核表达载体的相应位点,进行序列分析和酶切鉴定后,运用脂质体将重组体pcDNA3.1/ompA转染HeLa细胞,免疫组化法观察目的基因的表达.结果PCR扩增得到约1.2kb的特异性ompA基因片段;序列测定证实与发布序列一致;构建得到真核表达重组体;重组质粒pcDNA3.1/ompA在HeLa表达MOMP.结论Ct ompA基因能够在体外真核细胞中表达,为进一步研究CtDNA疫苗以及研究该蛋白的生物学功能提供实验基础.
ompA基因、转染、真核表达
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R374+.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
湖南省卫生厅科研项目B2003-079;湖南省科技厅科研项目01SSY2008-6
2004-06-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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