沙眼衣原体60 kDa外膜蛋白基因的克隆与表达

摘要：

目的克隆和表达沙眼衣原体60 kDa外膜蛋白(Omp2)基因. 方法 D型沙眼衣原体感染McCoy细胞后,抽提基因组DNA,经PCR扩增出omp2基因片段,与pUCm-T克隆载体连接,酶切纯化后克隆到原核表达载体pQE30,构建重组表达载体pQE30/omp2,PCR、酶切及测序鉴定.IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测有无蛋白的表达. 结果 (1)获得长约1 650 bp的PCR产物, 酶切结果显示所构建的重组质粒已成功地克隆了omp2 基因,序列分析结果与已知omp2序列相同;(2)SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量60 kDa处有表达条带;(3)诱导表达之菌体超声破碎后,目的蛋白主要以包涵体形式存在. 结论获得了Ct omp2基因片段,并在E.coli M15中成功表达.

关键词：沙眼衣原体、omp2 基因、基因克隆、表达

所属期刊栏目：11

分类号：R374+.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖南省卫生厅科研项目B2003-078;湖南省科技厅科研项目01SSY2008-6

在线出版日期：2004-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：7-10