微小RNA-107对气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响研究

摘要：

背景 微小RNA-107(miRNA-107)在多种肿瘤(如膀胱癌、乳腺癌)的发生发展过程中具有重要作用,但其在过敏性哮喘发生发展中的作用尚不完全清楚.目的 探讨miRNA-107对气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响.方法 本研究时间为2019年9月—2020年12月.原代培养SPF级雌性BABL/c小鼠的ASMCs,运用免疫荧光鉴定ASMCs.将细胞随机分为miRNA-107模拟物组(miRNA-107 mimic组)、模拟物对照组(mimic NC组)和miRNA-107抑制剂组(miRNA-107 inhibitor组)、抑制剂对照组(inhibitor NC组).miRNA-107 mimic组和mimic NC组的细胞分别转染5μl 20μmol/L的miRNA-107 mimic或5μl 20μmol/L的mimic NC+7.5μl viafect+200μl Opti-MEM无血清培养基;miRNA-107 inhibitor组和inhibitor NC组的细胞分别转染10μl 20μmol/L的miRNA-107 inhibitor或10μl 20μmol/L的inhibitor NC+15μl viafect+200μl Opti-MEM无血清培养基.采用荧光定量试剂盒检测各组ASMCs中miRNA-107相对表达水平,BrdU细胞增殖检测试剂盒(比色分析法)检测各组细胞增殖能力(吸光度差值),穿梭小室检测各组细胞迁移能力(迁移细胞数).分别比较miRNA-107 mimic组与mimic NC组、miRNA-107 inhibitor组与inhibitor NC组ASMCs中miRNA-107相对表达水平、细胞增殖能力和细胞迁移能力.结果 ASMCs从组织块周围呈放射状萌出,7 d后逐渐长满培养瓶,呈谷峰状;首次传代后,ASMCs呈梭形,多有突起,生长致密且平行排列;培养2代后的ASMCs经免疫荧光鉴定后有绿色荧光;经鉴定,99％以上的细胞均是ASMCs.miRNA-107 mimic组ASMCs中miRNA-107相对表达水平高于mimic NC组,吸光度差值、迁移细胞数低于mimic NC组(P<0.05).miRNA-107 inhibitor组ASMCs中miRNA-107相对表达水平低于inhibitor NC组,吸光度差值、迁移细胞数高于inhibitor NC组(P<0.05).结论 miRNA-107可以抑制ASMCs的增殖和迁移.抑制miRNA-107的表达可以促进ASMCs的增殖和迁移,这可能是哮喘患者发生气道重塑的机制之一.因此,miRNA-107有望作为抑制气道重塑的一个靶点,为哮喘的治疗提供新的方法.

关键词：哮喘、气道重塑、微小RNA-107、肌细胞、平滑肌、细胞增殖、细胞运动

所属期刊栏目：29

分类号：R562.25(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：广东省自然科学基金2020A1515011040

在线出版日期：2021-06-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：68-72