靶向调控miR-21-5p上调TIMP3抑制膀胱癌SCSP-571细胞ECM和EMT的机制研究

摘要：

目的 探讨靶向调控miR-21-5p上调金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP3)抑制膀胱癌细胞外基质降解(ECM)和上皮间质转化(EMT)的作用效果与机制.方法 96孔板培养膀胱癌SCSP-571细胞,分对照组、空载质粒组、miR-21-5p沉默组、TIMP3沉默组、miR-21-5p+ TIMP3沉默组.对照组常规培养,空载质粒组加空载质粒共培养,miR-21-5p沉默组加入miR-21-5p inhibitor;TIMP3沉默组加入TIMP3-shRNA慢病毒感染质粒;miR-21-5p+ TIMP3沉默组同时加入miR-21-5p inhibitor和TIMP3-shRNA慢病毒感染质粒.培养72h,采用荧光定量PCR实验测定各组miR-21-5p和TIMP3的mRNA表达,WB实验测定各组ECM和EMT标志物的表达,Transwell小室实验测定各组细胞迁移能力和侵袭能力.结果 与对照组相比,miR-21-5p沉默组E钙粘蛋白和TIMP3蛋白表达水平升高,同时N钙粘蛋白、纤维蛋白、MMP-2、MMP-7、MMP-9蛋白表达水平,细胞迁移与侵袭能力降低;TIMP3沉默组E钙粘蛋白和TIMP3蛋白表达水平降低,同时N钙粘蛋白、纤维蛋白、MMP-2、MMP-7、MMP-9蛋白表达水平,细胞迁移与侵袭能力升高,差异有统计学意义(均P＜0.05).miR-21-5p+ TIMP3沉默组的各项指标介于miR-21-5p沉默组与TIMP3沉默组之间,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 靶向调控miR-21-5p能够起到抑制膀胱癌细胞侵袭与转移的效果,作用机制可能与提高了TIMP3表达,从而抑制了MMPs介导的ECM与EMT有关.

关键词：膀胱癌、微小RNA-21-5p、上皮间质转化、细胞外基质降解、基质金属蛋白酶抑制因子

所属期刊栏目：17

分类号：R737.14;R730.43(肿瘤学)

资助基金：浙江省中医药管理局一般项目2016ZB036

在线出版日期：2019-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：533-537,608