miR-34c抑制人子宫内膜癌的机制分析

摘要：

目的 MicroRNAs (miRNAs)是内源性表达长度约为22个核苷酸的小RNA分子,通过结合到靶mRNA上而抑制基因的表达.近年的研究表明某些miRNAs可以调节肿瘤细胞的增殖与迁移,然而miRNA在子宫内膜癌中的作用有待于进一步探索.本研究旨在探讨miR-34c在人子宫内膜癌中的表达规律、功能和分子机制.方法 通过荧光定量PCR技术检测20例人子宫内膜癌组织标本中miR-34c的表达.通过阳离子脂质体介导的方法将miR-34c转染入人子宫内膜癌细胞RL95-2中,应用MTS法检测子宫内膜癌细胞的增殖,克隆形成实验检测子宫内膜癌细胞的生长,流式细胞术检测细胞周期,Transwell实验检测子宫内膜癌细胞的迁移.生物信息学和荧光素酶报告基因实验确认miR-34c作用的靶基因.RNAi技术下调c-Met的表达.通过蛋白印迹检测miR-34c对c-Met蛋白以及细胞内重要信号通路与细胞周期相关蛋白的影响.结果 miR-34c在子宫内膜癌中表达明显降低.miR-34c能使子宫内膜癌细胞RL95-2细胞周期滞留在G1期,显著抑制细胞的增殖.细胞移形实验发现miR-34c能够显著抑制RL95-2细胞迁移.生物信息分析表明c-Met是miR-34c作用的靶基因,进一步通过荧光素酶报告基因实验得以证实.蛋白印迹分析发现miR-34c能下调RL95-2细胞中的c-Met蛋白、p-Akt蛋白以及p-ERK1/2蛋白表达情况,同时还能够下调CDK4、CDK6蛋白以及p-Rb蛋白的表达水平.RNAi技术下调c-Met的表达能够明显抑制子宫内膜癌细胞的增殖与迁移.结论 本研究结果证明miR-34c通过作用于靶基因c-Met而抑制子宫内膜癌细胞的增殖与迁移,说明miR-34c是子宫内膜癌中的重要抑癌基因.

关键词：miR-34c、人子宫内膜癌、增殖、迁移、c-Met

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分类号：R737.33;R394(肿瘤学)

资助基金：浙江省科技计划项目Y20130334

在线出版日期：2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1282-1285