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10.3969/j.issn.2095-5332.2016.01.003

饱和氢气生理盐水对大鼠肝移植缺血/再灌注损伤中自噬的调节作用

引用
目的:研究饱和氢气生理盐水对大鼠原位肝移植缺血/再灌注损伤(IRI)中肝细胞自噬的调节作用。方法选取体重为220~250 g的健康雄性SD大鼠24只,采用随机数字表法将其分为3组(n=8):假手术组(Sham组)、原位肝移植组(OLT组)、饱和氢气生理盐水处理组(HS组)。Sham组仅进行开关腹操作。OLT组和HS组建立原位肝移植模型。HS组在肝下下腔开放即刻经肝下下腔静脉注射6 ml/kg含饱和氢气的生理盐水,OLT组则注射等量生理盐水。再灌注6 h及S组术毕6 h时取材,测定血清中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平,观察肝组织形态学改变,检测氧化应激水平,应用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ)和自噬相关因子Beclin-1蛋白表达,应用RT-PCR检测基因天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和细胞色素C(Cyt-c)的mRNA表达水平。结果与Sham组相比,OLT组和HS组肝功能和病理损伤明显(P<0.05),MDA水平升高超氧化物歧化酶(SOD)活性降低显著〔MDA(nmol/mg):1.25±0.13、1.02±0.11比0.64±0.07,SOD(U/mg):135.78±10.92、158.81±12.09比204.13±17.75,均P<0.05〕,凋亡及自噬水平均升高(caspase:2.02±0.26、1.67±0.17比1.09±0.18,Cyt-c:1.96±0.19、1.64±0.18比0.99±0.17,均P<0.05)。HS组与OLT组相比,各项指标均下降〔MDA(nmol/mg):1.02±0.11比1.25±0.13,caspase-3(2-ΔΔCt):1.67±0.17比2.02±0.26, Cyt-c(2-ΔΔCt):1.64±0.18比1.96±0.19,均P<0.05〕。结论饱和氢气生理盐水可通过抑制自噬,减少细胞凋亡,有效缓解肝移植中IRI。

氢气、原位肝移植、缺血/再灌注损伤、自噬

4

R65;R-3

天津市应用基础研究计划面上项目05YFJMJC14800;天津市卫生行业重点攻关项目13KG105

2016-04-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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2095-5332

11-9334/R

4

2016,4(1)

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