烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)ISSR反应体系的优化及遗传多样性分析

摘要：

以烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)基因组DNA为模板,采用单因素和正交设计L16(45)相结合的方法对影响ISSR-PCR反应的主要因子进行优化,并对采自东北三省烟区的20个烟草靶斑病菌菌株进行ISSR分析,建立了适宜于病菌的ISSR分子标记的最佳反应体系,即20μL的反应体系中含有模板DNA 30ng,Mg2+浓度2.0mmol·L-1,dNTP浓度0.20 mmol·L-1,Taq酶1.0U,引物浓度0.4μmol·L-1.利用优化的反应体系从20个ISSR引物中筛选出13个多态性和重复性好的引物,对20个烟草靶斑病菌菌株进行ISSR分析,共扩增出132条带,多态条带比率为73.48％,在相似系数0.74处将其划分为3个类群,其中LTL-7、HLK-1、HBX-2、HBX-4、LFC-9、LTL-5、LTL-9和JLH-1共8个菌株被划分在IG Ⅰ中;IGⅡ中包括LTL-6、LKD-8、HLK-3、LTL-115、LTL-2、LFC-4和LTL-8共7个菌株;其余5个菌株分别为LTL-66、LTL-111、HLK-4、JLH-3和LTL-22被划分到IGⅢ中.分析结果表明ISSR遗传聚类组群与菌株的地理来源具有一定的相关性,而与菌株的致病性无明显的相关性.

关键词：烟草靶斑病、立枯丝核菌、ISSR反应体系、遗传相似系数、聚类分析

所属期刊栏目：47

分类号：S435.72(病虫害及其防治)

资助基金：国家烟草专卖局科技项目国烟办综2010182号;辽宁省烟草专卖局科技攻关项目辽烟计201086号;黑龙江省烟草专卖局科技攻关项目HN201301号

在线出版日期：2016-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：97-102