树舌灵芝免疫调节蛋白基因克隆,生物信息学分析及真核表达载体构建

摘要：

树舌灵芝(Ganoderma applanatum)为灵芝属内独特的一类,克隆树舌灵芝免疫调节蛋白(fungal immunomodulatory protein,FIP)基因,对其进行生物信息学分析并构建真核表达载体,将为高效表达重组树舌灵芝FIP和揭示其生物学功能奠定基础.采用染色体步移的方法从树舌灵芝菌丝体基因组DNA中扩增得到1个新型真菌免疫调节蛋白基因—FIP-gap,对其核苷酸序列进行生物信息学分析,结果表明,FIP-gap基因属于灵芝属FIP家族,含有342 bp,编码113个氨基酸.对其氨基酸序列分析表明:树舌灵芝免疫调节蛋白FIP-gap分子量为12.7 kD,理论等电点为4.93,富含丝氨酸,缬氨酸和苏氨酸,不含组氨酸和半胱氨酸.另外将FIP-gap与其他灵芝属FIP进行蛋白质序列比对分析,其具有FIP典型的保守序列,并与灵芝(G.lucidum)、松杉灵芝(G.tsugae)、紫灵芝(G.japoncium)、紫芝(G.sinensis、小孢子灵芝(G.microsporum)和黑灵芝(G.atrum)具有78％、78％、78％、79％、78％和77％的同源性,为一新型的FIP.构建灵芝属真菌免疫调节蛋白系统进化树,结果表明树舌灵芝FIP-gap与其他灵芝属FIP均不聚类,说明其与其他灵芝属FIP的亲缘性相对较远.同时,构建了毕赤酵母重组表达载体pPIC9-FIP-gap,为进一步研究FIP-gap的生物学功能提供基础,为全面了解真菌免疫调节蛋白提供理论依据.

关键词：树舌灵芝、真菌免疫调节蛋白、生物信息学分析、染色体步移、基因克隆、真核表达

所属期刊栏目：47

分类号：S567.31(经济作物)

资助基金：中国博士后科学基金项目2013M541251

在线出版日期：2016-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7