新型HMW-GS基因1Dy12.1~(*t)植物双元表达载体的构建及其遗传转化

摘要：

为了建立快速研究高分子量谷蛋白亚基(high molecular weight glutenin subunit,HMW-GS)基因功能活性的植物表达体系,以自主克隆的新型HMW-GS基因1Dy12.1~(*t)为目的基因,利用限制性内切酶Xho Ⅰ和Sal Ⅰ切割后5'端能形成相同粘性末端的特性,成功构建了1Dy12.1~(*t)的植物双元表达载体pBINHP-GluT.该载体选择使用胚乳特异性强启动子,利用已知HMW-GS基因内部均不含有的Xba Ⅰ和Kpn Ⅰ内切酶位点引入1Dy12.1~(*t)编码区,并将1Dy12.1~(*t)的表达调控置于T-DNA区内,从而奠定了其在不同HMW-GS基因功能活性研究上的便利性.通过根癌农杆菌烟草叶盘转化研究目的基因1Dy12.1~(*t)在植物体的表达特性,SDS-PAGE和western blotting鉴定结果表明,1Dy12.1~(*t)在转基因烟草种子胚乳中得到高效表达,进一步证实了所克隆基因的正确性和所构建载体的有效性.

关键词：高分子量符蛋白亚基、载体构建、组织特异性启动子、遗传转化、基因表达

所属期刊栏目：40

分类号：S512.4(禾谷类作物)

资助基金：国家自然科学基金项目30571154;"863"计划资助项目2006AA10Z186

在线出版日期：2010-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：683-687