10.3969/j.issn.1003-9198.2019.01.006
不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析
目的 观察不同代次大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖能力及其纤维分化倾向,为临床治疗及组织工程种子细胞的选择提供依据.方法 采用贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,流式细胞术鉴定细胞表面标记;MTT法检测不同代次MSCs的增殖情况;蛋白质印迹法(Western Blot)检测MSCs Wnt通路相关蛋白的表达情况;实时聚合酶链式反应(Realtime-PCR)法检测不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记表达.结果 流式细胞术鉴定结果证实我们培养的大鼠MSCs符合间充质干细胞的特征,且纯度高;MTT法检测显示P3代之后细胞的增殖能力明显高于P1、P2代,Western Blot检测显示细胞内Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达随培养代次增强,Real-time-PCR法检测结果证实P9代细胞开始出现成纤维分化倾向.结论 MSCs作为种子细胞不宜超过P9代,P3 ~ P7代具有纯度高、倍增快等优点,是能够满足组织工程细胞植入的种子细胞.
骨髓间充质干细胞、不同代次、Wnt/β-catenin信号通路、成纤维分化
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R394.3
国家自然科学基金资助项目8130144;江苏省青年医学人才计划QNRC2016541;江苏省“六个一工程”拔尖人才科研项目LGY2017083,LGY2018067
2019-03-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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