藤黄酸对人胃腺癌细胞BGC-823细胞端粒酶逆转录酶和AKt蛋白磷酸化表达的影响

摘要：

目的探讨藤黄酸（ GA）对人胃癌细胞BGC-823端粒酶活性和端粒酶逆转录酶（ hTERT） mRNA、AKt蛋白磷酸化表达的影响。方法将处于对数生长期的BGC-823细胞制成细胞悬液，加入96孔酶标板内，加入不同浓度的GA孵育24、48、72 h后，收集细胞，采用MTT比色法测定半抑制浓度（ IC50）值；分别采用聚合酶链式反应（ PCR）、酶联免疫反应（ ELISA）法检测端粒酶的活性和逆转录PCR（ RT-PCR）法检测hTERT mRNA的表达；通过免疫共沉淀（IP）法获得hTERT与磷酸化AKt（p-AKt）蛋白的结合体，然后用Western blot法检测p-AKt蛋白表达的变化。结果 GA可以明显抑制胃癌细胞BGC-823的端粒酶活性和hTERT mRNA的表达，呈一定的时效、量效关系；进一步研究发现，GA能够抑制hTERT 和p-AKt蛋白的结合，且作用呈时间依赖性，进而影响p-AKt参与的hTERT的活化，从而完成对hTERT转录后的调控，抑制端粒酶的活性。结论 GA可明显抑制胃癌细胞BGC-823端粒酶活性和hTERT的表达，GA对BGC-823细胞生长抑制的作用机制可能与GA影响p-AKt参与的hTERT的活化，从而完成对hTERT转录后的调控有关。

关键词：人胃癌细胞BGC-823、藤黄酸、端粒酶、端粒酶逆转录酶、磷酸化AKt

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分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：江苏省科技厅资助项目BK20161598；南京市科技局资助项目201605006；江苏省肿瘤医院重点课题ZK201603

在线出版日期：2017-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：118-122