瘦素基因在人胎盘间充质干细胞中转染与表达

摘要：

目的：构建瘦素（leptin）基因真核表达载体，将其转染至人胎盘间充质干细胞（HPMSCs）中并鉴定其表达。方法：设计leptin基因引物，从人脂肪组织中RT-PCR扩增leptin基因，将获得的基因插入真核表达载体pIRES2-EGFP中，得到重组质粒pIRES2-EGFP-LEP，限制性内切酶双酶切鉴定重组质粒；用脂质体法将重组质粒转染至 HPMSCs 中并通过 RT-PCR及Western blotting法检测目的基因表达，鉴定转染后HPMSCs 的多向分化潜能。结果：RT-PCR扩增得到的特异性片段长度约为500 bp，重组质粒经双酶切后显示5．3 kb和500 bp左右的2条片段；转染后的HPMSCs表达leptin基因，保持多向分化潜能。结论：成功构建了瘦素基因真核表达载体，将其转入HPMSCs中并得以表达。

关键词：真核表达载体、人胎盘间充质干细胞、瘦素

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金编号30471804；吉林省自然科学基金编号201015201；吉林大学“大学生创新性实验计划”项目编号2012A78211

在线出版日期：2014-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：487-491