10.3969/j.issn.1001-3733.2007.02.015
趋化因子受体CXCR4 shRNA真核表达载体的构建
目的: 构建趋化因子受体(CXCR4)特异的RNA干扰质粒载体.方法: 根据GenBank 数据库提供的CXCR4基因核苷酸序列,选择设计能转录短发夹状RNA (short hairpin RNAs,shRNA) 的DNA 序列,并与pWH1质粒载体连接,用酶切的方法进行鉴定;将构建成功的特异性表达载体(pWH1-CXCR4)稳定转染至人涎腺黏液表皮样癌Mc3细胞系,并应用RT-PCR和流式细胞术对细胞CXCR4的表达进行检测.结果: 与Mc3细胞和转染空白质粒pWH1 Mc3细胞相比,转染pWH1-CXCR4表达载体的Mc3细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达明显降低.结论: 构建的CXCR4特异性shRNA表达载体可有效的沉默CXCR4基因,为进一步研究CXCR4表达对涎腺黏液表皮样癌增殖和转移的意义及治疗涎腺黏液表皮样癌奠定了基础.
涎腺、黏液表皮样癌、短发夹状RNA、真核表达载体、趋化因子受体4
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R3(基础医学)
国家自然科学基金30371551
2007-04-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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